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马尾藻是我国南海常见的大型经济褐藻,也是褐藻多糖的重要来源。褐藻多糖及其降解产物—褐藻寡糖,具有众多生物活性,在农业、医药、化妆品等领域具有广阔的应用前景。以采自海南琼海海域的孤囊马尾藻为研究对象,探究了一种有效提取褐藻多糖和酶解制备褐藻寡糖的方法,并对制备的褐藻多糖及寡糖进行纯化、结构分析和活性评价。研究结果如下:采用超声波辅助热碱法,通过响应面优化获得孤囊马尾藻多糖的比较好提取工艺,在超声功率500W、料液比1:25、提取时间5.95h、提取温度82.27℃、NaOH质量分数3.87%的条件下粗多糖得率为41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率达到81.93%,多糖保留率92.17%;优化了H2O2氧化法除色素工艺,在H2O2浓度1.5%、70℃条件下脱色6h时，重庆褐藻寡糖妇科抑菌,脱色率达到91.23%,多糖保留率为85.32%。采用DEAE-52离子交换层析柱对初步纯化后的多糖进一步分离纯化,获得SOP1、SOP2和SOP3三个多糖组分,并明确了它们的分子量、纯度以及总糖，重庆褐藻寡糖妇科抑菌、还原糖，重庆褐藻寡糖妇科抑菌、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分离的产褐藻胶裂解酶类芽孢杆菌新种,发酵制备粗酶液,发酵液酶活为15.20U/ml。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的小分子量片段。重庆褐藻寡糖妇科抑菌

    海藻提取物在作为综合作物营养剂方面受到普遍关注(NorrieandHiltz,1999)，而褐藻酸和褐藻寡糖(AOS)是其中的重要组成部分(Zhangetal.,2019)。褐藻酸由α-L-古罗糖醛酸(G)和β-D-甘露糖醛酸(M)通过1-4糖苷键连接(邰宏博等,2015)，由于其分子量大，性质不稳定等特点，因此应用范围较小(孙哲朴等,2019)。褐藻寡糖是褐藻酸的降解产物，聚合度一般为2-10，可由生物法、化学法、物理法等方法制备得到。褐藻寡糖具有分子量低、性质稳定、水溶性强、安全无毒等特点，在医药、农业、生活日用等方面有更广阔的应用空间(王媛媛等,2010)。如：施用3%的褐藻寡糖可提高小麦种植中氮肥的利用率，进而提高小麦的产量和品质(张朝霞等,2014b)；在水稻培育中施用效提高水稻蛋白质等含量，同时提高产量(张运红等,2016)；在玉米培育中施用，可明显提高玉米的肥料利用率和产量(张朝霞等,2013)。此外，在土壤修复和抗污染方面(张朝霞等,2014a;余劲聪,2016)、水果保鲜方面(蓝炎阳等,2013;陈锋,2014)均有重要应用。 浙江褐藻寡糖适合人群褐藻寡糖用过的容器应妥善保管，不可做他用，也不可随意丢弃。

褐藻寡糖应用于翅碱蓬种子的萌发和抗逆中，研究了褐藻寡糖对翅碱蓬种子萌发和不同盐度下抗盐胁迫能力的影响。结果表明，褐藻寡糖可有效提高翅碱蓬种子的萌发率，由清水对照组的66.67%提升至0.02mg/mL的78.33%，同时萌发的幼芽中可溶性糖含量也有较大提升；经褐藻寡糖处理，盐胁迫下翅碱蓬种子的萌发率、萌发芽长有明显的提升，翅碱蓬幼芽中游离脯氨酸含量提升，在200mmol/L及以上盐浓度下效果尤为明显。结果显示种子在褐藻寡糖的作用下抗盐胁迫能力提高，在黄河三角洲的高盐环境中可促进翅碱蓬幼苗的生长和抗逆能力的提升。翅碱蓬是黄河三角洲地区重要的耐盐草本植物，但在当前的应用中存在着种植成活率低的问题，尤其是幼苗移植生长时期，幼苗后续成活率低，浪费了大量的人力物力财力。在翅碱蓬的生活史中，种子萌发和幼芽生长是基础的部分，这两个阶段的生长状况关系到翅碱蓬后续移植成活率的高低。

选择三种来源（褐藻胶、果胶、壳聚糖）的不同分子量大小的九种寡糖片段进行研究。利用植物的促生长和抗逆指标进行筛选，获得了一种既具 有明显的促生长作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，为褐藻寡糖 HZ3，经过质谱分析，其组分是以二、三糖为主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。本研究第二部分是利用植物的植株、愈伤组织和悬浮细胞为材料，建立起寡糖促生长的综合性的验证方法。对植株分别选择了双子叶植物豌豆和单子叶植物玉米，利用寡糖浸种，分别考察在种子萌发与幼苗生长初期其体内蛋白酶、淀粉酶和激S含量的变化，结合种子与植株的生长指标，探讨寡糖的促生长作用机理。褐藻寡糖与作物细胞作用后还可以在细胞的信号转导过程中，对细胞的生物活性进行调节，增强植物抗病能力。

研究了在浸麦阶段添加褐藻胶寡糖对大麦发芽力和发芽率、大麦发芽过程中水解酶活力及麦芽质量的影响。结果表明，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖时大麦发芽力和发芽率比对照组分别提高了４６．４％和１２．０％。褐藻胶寡糖能够显著提高大麦发芽过程中α－淀粉酶、β－淀粉酶、蛋白酶和β－葡聚糖酶活力。发芽结束时，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖的α－淀粉酶、β－淀粉酶、蛋白酶和β－葡聚糖酶活力比对照组分别提高了４３．５％、２２．９％、２０．６％和２０．５％。褐藻胶寡糖还能提高麦芽质量，与对照组相比，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖时麦芽的脆度、浸出物质量分数、α－氨基氮质量分数、库尔巴哈值和糖化力分别提高了６．１％、８．０％、２１．２％、７．３％和８．６％，麦芽的β－葡聚糖质量分数和黏度分别降低了２９．２％和１５．４％。褐藻寡糖可以通过SA信号途径促进NPR1和PR1蛋白基因的表达，使植株获得系统性抗性，增强对病毒的抵抗能力。浙江褐藻寡糖适合人群

褐藻寡糖在一定浓度下能够促进种子萌发及幼苗的生长提高叶绿素的合成速率及种子的酶活力诱导植物的抗病性。重庆褐藻寡糖妇科抑菌

褐藻寡糖对CAT活性的影响植物遭受低温伤害时,过氧化氢酶系统首先受到破坏损伤,造成体内过氧化氢去除链条断裂、积累增加,由于过氧化氢积累可以严重损害植物细胞膜和其它代谢酶类,因此CAT活力能够反映植物去除过氧化氢能力强弱和植物遭受损程度大小。图6为烟C叶片CAT活力变化。由图可知,水处理组在低温胁迫后,短时间内CAT活力迅速下降,随着时间延长,植物体内抗逆反应启动,会增加CAT生成以去除积累的过氧化氢,因此CAT含量又缓慢升高。喷施寡糖后进行低温胁迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO组中烟CCAT活力变化规律相似:短时间内均能够诱导烟CCAT活力迅速升高,12h达到高峰,且峰值都高于空白对照,随着时间延长,CAT活力又缓慢下降,以0.20%褐藻寡糖的诱导效果好;0.10%褐藻寡糖处理组在6～24h之内CAT含量与对照相比变化较小,但48h烟C叶片CAT活力迅速下降,说明CAT受到破坏而活力降低。高浓度1.00%褐藻寡糖组经过相同时间低温胁迫,其CAT活力均低于水处理组,说明1.00%褐藻寡糖对烟C产生了毒副作用,加剧了烟C叶片损伤。重庆褐藻寡糖妇科抑菌

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